1. Περιγραφή
Το Rapid Test FLU_COVID είναι μια ποιοτική ανοσολογική μέθοδος lateral flow η οποία σχεδιάστηκε
για να ανιχνεύει την ύπαρξη αντιγόνων του SARS-CoV-2 και του ιού της γρίπης (INFLUENZA A και B)
σε άμεσο ρινικό ή ρινοφαρυγγικό επίχρισμα.
2. Αρχή μεθόδου
Σε αυτό το τεστ, αντισώματα ειδικά για νουκλεοπρωτείνες του ιού της γρίπης Α (Influenza A) και Β
(Influenza B) είναι ανοσοκαθηλωμένα στην ζώνη ανίχνευσης FLuA και FluB της μεμβράνης
νιτροκυτταρίνης αντιστοιχα. Αντισώματα ειδικά για την πρωτείνη του νουκλεοκαψιδίου του SARS-CoV-
2 είναι ανοσοκαθηλωμένα στην ζώνη ανίχνευσης CoV της μεμβράνης νιτροκυτταρίνης Κατά τη
διάρκεια του τεστ, αντιγόνα που βρίσκονται στο δείγμα, αντιδρούν με ειδικά αντισώματα που
βρίσκονται προσροφημένα σε σωματίδια κολλοειδή χρυσού. Καθώς το δείγμα ανεβαίνει στην
μεμβράνη θα αντιδράσει με τα αντισώματα στις ζώνες ανίχνευσης σχηματίζοντας έγχρωμη ζώνη στην
FluA, FluB ή CoV. Ως ένδειξη έγκυρης λειτουργίας του τεστ, θα εμφανίζεται πάντα μια έγχρωμη ζώνη
στη θέση ελέγχου (control line).
3. Εισαγωγή
Τον Δεκέμβριο του 2019 ένας νέος κορονοϊός (SARS-CoV-2) άρχισε να προσβάλει με ταχεία
εξάπλωση κατοίκους της πόλης Ουχάν στην επαρχία Χουπέι στην Κίνα, με συμπτώματα πνευμονίας.
Ο ιός πέρασε γρήγορα τα σύνορα της χώρας με αποτέλεσμα εκατομμύρια επιβεβαιωμένα κρούσματα
παγκοσμίως. Τα πιο κοινά συμπτώματα σύμφωνα με τον Παγκόσμιο Οργανισμό Υγείας είναι
παρόμοια με άλλες αναπνευστικές νόσους και περιλαμβάνουν πυρετό, ξηρό βήχα και κόπωση. Ο ιός
μεταδίδεται κυρίως μέσω των σταγονιδίων της στοματικής και ρινικής κοιλότητας κατά τη διάρκεια
ομιλίας, βήχα ή και φταρνίσματος.
Η γρίπη είναι μια ιογενής λοίμωξη του αναπνευστικού συστήματος που οφείλεται στον ιό INFLUENZA
τύπου A, B ή C. Είναι εξαιρετικα μεταδοτική ενώ εμφανίζει εποχικές εξάρσεις. Μεταδίδεται εύκολα
μέσω των σταγονιδίων της στοματικής και ρινικής κοιλότητας κατά τη διάρκεια ομιλίας, βήχα ή και
φταρνίσματος. Ο ιός τύπου Α είναι πιο κοινός και προκαλλεί συνήθως σοβαρότερες λοιμώξεις ενώ
κατα καιρούς εκτός από επιδημική και εποχική γρίπη προκαλλεί και πανδημίες.
6. Οδηγίες αποθήκευσης
Αποθήκευση του κιτ μεταξύ 4 και 30°C (39.2 - 96°F). Να μην παγώσει κανένα από τα περιεχόμενα του
κιτ. Η ημερομηνία λήξης του κιτ και των επιμέρους περιεχομένων του αναγράφεται σε ετικέτες και δεν
υπάρχει εγγύηση ποιότητας μετά την λήξη τους. Η λήξη των προϊόντων ισχύει με την προϋπόθεση ότι
όλα τα περιεχόμενα αποθηκεύονται κατάλληλα και τα αντιδραστήρια δεν έχουν επιμολυνθεί κατά τη
χρήση τους.
7. Ασφάλεια και προφυλάξεις για τη χρήση
7.1 Προφυλάξεις για την υγεία και την ασφάλεια
• Χρήση γαντιών, ειδικής προστατευτικής ενδυμασίας, γυαλιά/μάσκα προσώπου και σωστός
χειρισμός σύμφωνα με τις απαραίτητες ορθές εργαστηριακές πρακτικές. Το προϊόν πρέπει να
χρησιμοποιείται μόνο από εξειδικευμένο προσωπικό.
• ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗ ΑΠΟΒΛΗΤΩΝ : Μετά την εκτέλεση του τεστ απορίψτε όλα τα δειγματα και τα υλικά που
χρησιμοποιήθηκαν ως απόβλητα βιολογικού κινδύνου. Η διαχείριση και η απόρριψη των αποβλήτων
βιολογικού κινδύνου ακολουθεί την εκάστοτε εθνική και διεθνή νομοθεσία.
• Κατά τη διάρκεια δειγματοληψίας, τυχόν ανθρώπινα σταγονίδια βήχα, φταρνίσματος πρέπει να
αντιμετωπίζονται σαν πιθανώς μολυσματικά και να απολυμαίνονται άμεσα όλες οι επιφάνειες.
• Μην επαναχρησιμοποιείτε κανένα από τα περιεχόμενα του προϊόντος καθώς είναι μιας χρήσης
μόνο.
• Οι αποστειρωμένοι στυλεοί είναι ΜΟΝΟ για λήψη ρινικού ή ρινοφαρυγγικού δείγματος. Αποφεύγεται
η επαφή με την άκρη τους.
• Όλα τα θετικά δείγματα πρέπει να ακολουθούν τις τοπικές οδηγίες και Αρχές.
7.2 Προφυλάξεις σχετικά με τη διαδικασία
• Σύμφωνα με το άρθρο 1, παράγραφος 2β της Ευρωπαϊκής Οδηγίας 98/79/ΕΚ, η χρήση
ιατροτεχνολογικών προϊόντων διάγνωσης in vitro προβλέπεται από τον κατασκευαστή για να
εξασφαλισθεί η καταλληλότητα, η απόδοση και η ασφάλεια αυτών των προϊόντων. Συνεπώς, η
διαδικασία της μεθόδου, πληροφορίες, περιορισμοί και προειδοποιήσεις πρέπει να ακολουθούνται
αυστηρά. Δεν επιτρέπονται αλλαγές στη διαδικασία, ούτε η συνδυαστική χρήση με άλλα προϊόντα. Ο
χρήστης είναι ο μόνος υπεύθυνος για τέτοιες αλλαγές. Ο κατασκευαστής δεν είναι υπεύθυνος για
ψευδή και μη έγκυρα αποτελέσματα που προκύπτουν σε τέτοιες περιπτώσεις.
• ΜΗΝ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΣΕΤΕ το κιτ εάν η συσκευασία των εξαρτημάτων είναι κατεστραμμένη, εάν
υπάρχει κάποιο αντιδραστήριο που έχει λήξει ή εάν το ξηραντικό υλικό απουσιάζει.
• Όλα τα αντιδραστήρια θα πρέπει πριν τη χρήση να επέλθουν σε θερμοκρασία δωματίου.
• Καλύψτε όλα τα αντιδραστήρια όταν δεν χρησιμοποιούνται.
• Μην αναμιγνύετε και ανταλλάσσετε διαφορετικά δείγματα .
• Μην ανταλλάσσετε μεμονωμένα αντιδραστήρια μεταξύ κιτ με διαφορετικούς αριθμούς παρτίδας
(Lot).
8. Δειγματοληψία
8.1 Δειγματοληψία επιχρίσματος μεσαίας ρινικής
κοιλότητας
Κρατάτε το κεφάλι του ασθενή με οπίσθια κλιση 70 μοιρών.
Αφαιρείτε έναν αποστειρωμένο στυλεό από το σακουλάκι. Με
απαλή περιστροφική κίνηση εισέρχεται στη ρινική κοιλότητα
(ρουθούνι) του ασθενή (περίπου 2 εκατοστά). Περιστρέφετε τον
στυλεό 5 φορές και αφαιρείται σιγά. Χρησιμοποιώντας τον ίδιο
στυλεό επαναλαμβάνετε την διαδικασία και στη δεύτερη ρινική
κοιλότητα. (Εικόνα 1)
8.2 Δειγματοληψία ρινοφαρυγγικού επιχρίσματος
Κρατάτε το κεφάλι του ασθενή με οπίσθια κλιση 70 μοιρών.
Αφαιρείτε έναν αποστειρωμένο στυλεό από το σακουλάκι.
Τοποθετείτε τον στυλεό στη ρινικλη κοιλότητα του ασθενή. Όταν
φτάσει στον οπίσθιο ρινοφάρυγγα στριφογυρίστε 3-5 φορές και
αφαιρέστε απαλά. (Εικόνα 2)
9. Διαδικασία μεθόδου
9.1 Υπολογίστε τον αριθμό των αποστειρωμένων στυλεών που θα χρειαστούν, σύμφωνα με των αριθμό
των δειγμάτων που θα συλλεχθούν.
9.2 Μετά τη δειγματοληψία (βλ. ενότητα 8), τοποθετήστε το στυλεό στο σωλήνα εκχύλισης,
στριφογυρίστε έντονα πιέζοντας στα τοιχώματα για περίπου 1 λεπτό. Καλύτερα αποτελέσματα
λαμβάνονται από πιο μια αποτελεσματική εκχύλιση.
9.3 Αφαιρέστε τον στυλεό πιέζοντας τις άκρες του σωλήνα ώστε να εκχυλιστεί όσο περισσότερο υγρό.
9.4 Απορρίψτε τον στυλεό.
9.5 Κλείστε το σωλήνα εξαγωγής με το σταγονόμετρο. Προσθέστε 3 σταγόνες στο κυκλικό παράθυρο
της κασέτας.
9.6 Μετά από 15 λεπτά το στικ μπορεί να διαβαστεί οπτικά και να αξιολογηθεί το αποτέλεσμα.
Σημείωση: Τα αποτελέσματα δεν πρέπει να αξιολογούνται μετά τα 30 λεπτά.
ΘΕΤΙΚΟΣ/ΑΡΝΗΤΙΚΟΣ ΜΑΡΤΥΡΑΣ: Ρίξτε απευθείας 2 σταγόνες από τον μάρτυρα στο κυκλικό
παράθυρο της κασέτας.
10. Ερμηνεία των αποτελεσμάτων
Σημείωση: Για λόγους εσωτερικής διαδικασίας υπάρχουν τέσσερις έγχρωμες γραμμές στην περιοχή των
αποτελεσμάτων του Rapid Test FLU_COVID. Οι χρωματιστές γραμμές δεν έχουν καμία επίδραση στην
απόδοση του προϊόντος, καθώς ξεπλένονται κατά τη διάρκεια του πειράματος.
Θετικό για γρίπη A: Δύο ορατές έγχρωμες ζώνες εμφανίζονται στη γραμμή εξέτασης FluA και στη
γραμμή ελέγχου (Control line). Υποδεικνύει την ύπαρξη αντιγόνου του ιού της γρίπης τύπου Α στο
δείγμα.
Θετικό για γρίπη Β: Δύο ορατές έγχρωμες ζώνες εμφανίζονται στη γραμμή εξέτασης FluB και στη
γραμμή ελέγχου (Control line). Υποδεικνύει την ύπαρξη αντιγόνου του ιού της γρίπης τύπου Β στο
δείγμα.
Θετικό για γρίπη Α και Β: Τρεις ορατές έγχρωμες ζώνες εμφανίζονται στη γραμμή εξέτασης FluA,
FluB και στη γραμμή ελέγχου (Control line). Υποδεικνύει την ύπαρξη αντιγόνου του ιού της γρίπης
τύπου Α και Β στο δείγμα.
Θετικό για γρίπη Α και SARS-CoV-2: Τρεις ορατές έγχρωμες ζώνες εμφανίζονται στη γραμμή
εξέτασης FluA, Cov και στη γραμμή ελέγχου (Control line). Υποδεικνύει την ύπαρξη αντιγόνου του ιού
της γρίπης τύπου Α και SARS-CoV-2 στο δείγμα.
Θετικό για γρίπη Β και SARS-CoV-2: Τρεις ορατές έγχρωμες ζώνες εμφανίζονται στη γραμμή
εξέτασης FluΒ, Cov και στη γραμμή ελέγχου (Control line). Υποδεικνύει την ύπαρξη αντιγόνου του ιού
της γρίπης τύπου Β και SARS-CoV-2 στο δείγμα.
Θετικό για SARS-CoV-2: Δύο ορατές έγχρωμες ζώνες εμφανίζονται στη γραμμή εξέτασης CoV και στη
γραμμή ελέγχου (Control line). Υποδεικνύει την ύπαρξη αντιγόνου του SARS-COV-2 στο δείγμα.
Θετικό για γρίπη Α, Β και για SARS-CoV-2: Τέσσερις ορατές έγχρωμες ζώνες εμφανίζονται στη
γραμμή εξέτασης FluA, FluB, CoV και στη γραμμή ελέγχου (Control line). Υποδεικνύει την ύπαρξη
αντιγόνου της γρίπης Α και Β και του SARS-COV-2 στο δείγμα.
Αρνητικό: Μία ορατή έγχρωμη ζώνη εμφανίζεται στη γραμμή ελέγχου. Δείχνει ότι η συγκέντρωση του
αντιγόνου είναι μηδενική ή κάτω από το όριο ανίχνευσης της δοκιμής.
Μη έγκυρο: Δεν εμφανίζεται έγχρωμη ζώνη στη γραμμή ελέγχου ανεξάρτητα από το αν εμφανίζεται
στις γραμμές εξέτασης ή όχι.
11. Περιορισμοί
• Η διαδικασία του τεστ, οι προφυλάξεις και η αξιολόγηση των αποτελεσμάτων πρέπει να
ακολουθούνται αυστηρά.
• Μετα τη δειγματοληψια η εκχύλιση απο τον στυλεό να γίνεται το συντομότερο δυνατό. Ειδάλλως
μπορεί να παραμείνει στην αρχική του συσκευασία για 2 ωρες σε θερμοκρασία δωματίου. Οταν
χρησιμοποιείται υγρό μέσο μεταφόρας ιού, ξαναχρησιμοποιείται ο στυλεός για δευτερη εκχύλιση στον
σωλήνα εκχύλισης με το buffer της Prognosis Biotech. Σε αυτές τις περιπτώσεις η ευαισθησία του
τεστ μπορεί να εμφανιστεί μειωμένη λόγω υπερβολικής αραίωσης του δείγματος.
Σημείωση: Tο υγρό μέσο μεταφοράς να μην περιέχει χαοτροπικούς παράγοντες όπως Guanidinium
thiocyanate.
• Όλα τα εκχυλισμένα δείγματα πρέπει να εξετάζονται άμεσα. Σε αντίθετη περίπτωση μπορούν να
μείνουν σε θερμοκρασία δωματίου 20-25°C (68-77°F) για 2 ώρες. Σε αυτή τη περίπτωση ο σωλήνας
εκχύλισης κλείνει με το ειδικό καπάκι του χωρίς να πεταχτεί ο σταγονομετρητής.
Εικόνα 1. Ρινικό επίχρισμα
Εικόνα 2. Ρινοφαρυγγικό
4. Αντιδραστήρια που παρέχοντα
V1601 V1605 V1620
Συσκευή δοκιμής 1 5 20
Προγεμισμένος σωλήνας
εκχύλισης με διάλυμα 1 5 20
Aποστειρωμένοι στυλεοί 1 5 20
Χάρτινη βάση - - 1
Θετικός μάρτυρας* - - 1
Αρνητικός μάρτυρας* - - 1
Εγχειρίδιο χρήσης 1 1 1
5. Υλικά που απαιτούνται αλλά δεν
παρέχονται
• Ρολόι ή χρονόμετρο
• Γάντια, μάσκα και ειδικά γυαλιά
• Δοχείο απόρριψης βιολογικών αποβλήτων
Ερμηνεία των αποτελεσμάτων
• Το τεστ πρέπει να χρησιμοποιείται για την ανίχνευση αντιγόνων του ιού ΜΟΝΟ σε ρινικό ή
ρινοφαρυγγικό δείγμα.
• Η μη σωστή τήρηση των κανόνων δειγματοληψίας, εκχύλισης και εκτέλεσης του τεστ ενδέχεται να
επηρεάσουν τη διαδικασία και το έγκυρο αποτέλεσμα.
• Κατά τη δειγματοληψία να χρησιμοποιούνται ΜΟΝΟ οι αποστειρωμένοι στυλεοί του προϊόντος.
• Κατά τη διάρκεια της δειγματοληψίας να αποφευχθεί η επαφή με περιοχές της ρινικής κοιλότητας με
τυχόν βλεννώδεις εκκρίσεις ή αγγεία που αιμορραγούν καθώς μπορεί να παρεμβαίνουν στη σωστή
λειτουργία του τεστ και να οδηγήσουν σε ψευδώς θετικό αποτέλεσμα.
• Θετικό αποτέλεσμα υποδεικνύει παρουσία αντιγόνων του ιού SARS-CoV-2 ή του ιού της γρίπης
αλλά η έγκυρη διάγνωση της λοίμωξης θα πρέπει να γίνεται από ειδικό γιατρό κατόπιν αξιολόγησης
όλων των κλινικών και εργαστηριακών αποτελεσμάτων καθώς και την συμπτωματολογία του
ασθενή.
• Αρνητικό αποτέλεσμα μπορεί να προκύψει αν το αντιγόνο του εκχυλισμένου δείγματος είναι
χαμηλότερο του ορίου ανίχνευσης της μεθόδου, ή αν δεν έχει πραγματοποιηθεί σωστή
δειγματοληψία και εκχύλιση.
• Θετικά αποτελέσματα δεν αποκλείουν την μόλυνση και από άλλο παθογόνο μικροοργανισμό.
12. Απόδοση της ανοσοδοκιμασίας
12.1 Διασταυρούμενη αντίδραση
Προκειμένου να αξιολογηθεί η διασταυρούμενη αντίδραση του Rapid Test FLU_COVID με άλλα
παθογόνα, πραγματοποιήθηκε αξιολόγηση. Δεν βρέθηκε καμία διασταυρούμενη αντίδραση με
παθογόνα που θα μπορούσαν να προκαλέσουν λοιμώξεις.
Το Rapid Test FLU_COVID μπορεί να εμφανίσει διασταυρούμενη αντίδραση με τον SARS ή τον MERS.
Μικροοργανισμός Συγκέντρωση Αποτέλεσμα
Adenovirus Type 1 (Species C) 2.57 x 108 TCID50/mL Αρνητικό
Adenovirus Type 3 (Species B) 3.39 x 107 TCID50/mL Αρνητικό
Adenovirus Type 7A (Species B) 1.02 x 108 TCID50/mL Αρνητικό
Alpha coronavirus 229E 4.68 x 104 TCID50/mL Αρνητικό
Alpha coronavirus NL63 1.70 x 105 TCID50/mL Αρνητικό
Beta coronavirus OC43 5.01 x 105 TCID50/mL Αρνητικό
Escherichia Coli O157 6.4x106 CFU/ml Αρνητικό
Influenza A virus* 1.51 x 106 TCID50/mL Αρνητικό
Influenza B virus* 5.01 x 105 TCID50/mL Αρνητικό
Listeria monocytogenes 2.5x106 CFU/ml Αρνητικό
Salmonella enteritidis 3.6x106 CFU/ml Αρνητικό
SARS-Cov-2* 1.15 x 107 TCID50/mL Αρνητικό
Streptococcus pneumococcal 4.2x106 CFU/ml Αρνητικό
Streptococcus pyogenes 3.6x106 CFU/ml Αρνητικό
12.2 Παρεμβολές άλλων ουσιών
Οι ακόλουθες ουσίες δεν έδειξαν σημαντική παρεμβολή με τα αποτελέσματα του Rapid Test FLU_COVID.
N Παρεμβαλόμενες ουσίες Τελική συγκέντρωση τεστ
1 Azithromycin 84 mg/ml
2 Amoxicillin 54 mg/L
3 Albuterol 0.05 mg/L
4 Acarbose 0.3 mg/L
5 Chlorpheniramine 0.8 mg/L
6 Chlorothiazide 27 mg/L
7 Rheumatoid factor 200 IU/ml
8 Triglycerides 1.5 mg/L
9 Hemoglobin 100 mg/L
10 Human Chorionic Gonadotropin 10-fold dilution
11 Ibuprofen 219 mg/L
12 Xylometazoline (Otriven) 10%
13 Acetylsalicylic Acid 3 mg/ml
14 Mucin 0.5%
12.3 Αρνητική επίδραση υψηλής συγκέντρωσης (High Dose Hook Effect)
Δεν παρατηρήθηκε αρνητική επίδραση υψηλής συγκέντρωσης σε συγκέντρωση μέχρι και 1.15 x 107
TCID50/mL του απενεργοποιημένου με θέρμανση ιού SARS-CoV-2, 1.51 x 106 TCID50/mL του
απενεργοποιημένου με θέρμανση ιού Influenza A, 5.01 x 105 TCID50/mL του απενεργοποιημένου με
θέρμανση ιού Influenza B, με το Rapid Test FLU_COVID.
12.4 Όριο ανίχνευσης μεθόδου
Το χαμηλότερο όριο συγκέντρωσης ενός αναλύτη που μπορεί να ανιχνευθεί με μία μέθοδο ορίζεται
ως το όριο ανίχνευσης της μεθόδου (Limit Of Detection, LOD). Σέ αυτή τη περίπτωση σειριακές
αραιώσεις των απενεργοποιημένων με θέρμανση ιών χρησιμοποιήθηκαν για να εντοπισθεί το όριο
ανίχνευσης του Rapid Test FLU_COVID. Ως LOD ορίζεται η συγκέντρωση στην οποία πάνω από το
95% των επαναλήψεων έδωσαν θετικό αποτέλεσμα.
Όριο ανίχνευσης μεθόδου για SARS-CoV-2 (LOD): 358.75 TCID50/mL
Όριο ανίχνευσης μεθόδου για Influenza A (LOD): 75.5 TCID50/mL
Όριο ανίχνευσης μεθόδου για Influenza B (LOD): 12.5*102 TCID50/mL
Lateral Flow Test |
Για την ανίχνευση αντιγόνων του SARS-CoV-2 και του ιού της γρίπης (Influenza A/B)
σε ανθρώπινα ρινικά ή ρινοφαρυγγικά δείγματα.
Κρίνεται απαραίτητη η χρήση της συγκεκριμένης έκδοσης του φύλλου
δεδομένων του προϊόντος το οποίο εσωκλείεται στο kit.
Το Rapid Test FLU_COVID, V16XX, είναι ένα ποιοτικό Lateral Flow test με στόχο την
ανίχνευση αντιγόνων του SARS-CoV-2 και της γρίπης σε ρινικό ή ρινοφαρυγγικό
δείγμα.
Το Lateral flow kit περιέχει όλα τα αντιδραστήρια που είναι απαραίτητα για τη μέθοδο.
Δείγμα: Ρινικό ή ρινοφαρυγγικό επίχρισμα
• Μόνο για χρήση από επαγγελματίες
• Μόνο για in vitro διαγνωστική χρήση
• Το Rapid Test FLU_COVID είναι μια ευαίσθητη μέθοδος ελέγχου για την ανίχνευση
του SARS-CoV-2 ή/και του ιού της γρίπης A και Β. Τα αποτελέσματα δεν μπορούν
να χρησιμοποιηθούν ως το μόνο μέσο για τη διάγνωση ή για τον καθορισμό του
σταδίου της λοίμωξης.
• Αρνητικά αποτελέσματα δεν αποκλείουν την μόλυνση από SARS-CoV-2/ INFLUEN-
ZA A/B
• Το τεστ πρέπει να διεξάγεται ΜΟΝΟ από επαγγελματίες υγείας και ιατρικό
προσωπικό.
• Χρόνος μεθόδου: 15 λεπτά
• Διάρκεια ζωής: 24 μήνες
• Αποθήκευση: 4-30οC
